游戏共有五个主要章节和一个DLC，包括死亡中心、黑暗狂欢节、沼泽激战、暴风骤雨及教区。这些章节按照剧情发展顺序排列，玩家在完成一个章节后会自动进入下一章节。求生之路2的关卡顺序是固定的，玩家可以通过游戏内界面或控制台命令查看。
在游戏主菜单选择战役模式，系统会显示所有可用章节的列表。这个列表按照游戏内时间线排列，从上到下依次为死亡中心、黑暗狂欢节、沼泽激战、暴风骤雨和教区。每个章节包含多个小关卡，玩家需要按顺序完成才能解锁后续内容。游戏中的DLC一面之缘则穿插在主线章节之间。
死亡中心章节开始于酒店隔离区，幸存者试图前往购物中心寻找逃生方法。黑暗狂欢节章节发生在游乐场，幸存者需要利用舞台烟火引起直升机注意。沼泽激战章节从直升机坠毁开始，幸存者联络上一艘船的船长。暴风骤雨章节中幸存者需要寻找柴油为船只补充燃料。教区章节最终幸存者发现军方准备炸毁桥梁。
关卡顺序特别是涉及到前作角色牺牲的章节有困难，这是由于游戏更新后加入了额外内容，但这些内容并不影响主线剧情的连贯性。游戏设计上每个剧情都是相对独立的，玩家只需按照系统提供的顺序进行游戏即可体验完整故事。
游戏中的关卡顺序设计考虑了难度曲线和场景多样性。从室内到室外，从白天到黑夜，从城市到乡村，玩家将体验不同类型的战斗环境和僵尸配置。这种设计保证了游戏体验的新鲜感和挑战性，同时也让玩家能够逐步适应游戏机制和提高操作技巧。
